جرت بعون الله تعالى مناقشة رسالة طالب الماجستير سيف محمد ابراهيم من قسم علوم الحياة وذلك في يوم الثلاثاء الموافق 19 / 1/ 2016 وعلى قاعة المرحوم الاستاذ سالم عبد الحميد عن رسالته الموسومة :
الكشف عن السمية الوراثية لمستخلص نبات الحرمل Peganum harmala L. باستخدام المؤشرات الخلوية والجزيئية
وقد تألفت لجنة المناقشة من كل من التدريسيين الافاضل :
أ.م.د. حسام الدين سعد الله رئيساً
أ.م.د. جنان قاسم حسين عضواً
م.د. محمد مهدي جواد عضواً
أ.م.د. نضال نعمة حسين عضواً مشرفاً
الخلاصة
تم تقييم السمية الوراثية للمستخلص المائي والكحولي لبذور نبات الحرمل Peganum harmala L. فــــي جذور نبات البصل كنظام بايولوجي .عرضت جذور نبات البصل للتراكيز % 200,100,50,25,10 وزن/حجم من المستخلص المائي او الكحولي ولمدد التعريض المختلفة 72,48,24 ساعة لاجل دراسة تاثير هذه المستخلصات في متوسط طول جذور نبات البصل وفي بعض الصفات الخلوية ( دليل الانقسام , دليل الاطوار , نسبة وانواع التشوهات الكروموسوميه) , فضلا عن دراسة تاثير هذه المستخلصات في دنا DNA جذور نبات البصل باستعمال تقانة التضاعف العشوائي المـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــتعدد الاشكال للدناDNA Random amplified polymorphic DNA(RAPD) .
بينت النتائج بان مستخلصات بذور الحرمل المائية والكحولية أدت الى تثبيط معنوي فـي متوسط طول جذور البصل وقد زاد تثبيط نمو الجذور كلما زاد تركيز المستخلص. وجد ان التركيز نصف المؤثر EC50 Effective concentration 50% في نمو جذور نبات البصل كان 50% عند استعمال المستخلص المائي و25% عـــند استعمال المستخلص الكحولي , لذا فان المستخلص الكحولي أكثر تاثيرا في نمو جذور نبات البصل من المستخلص المائي.
بينت النتائج كذلك بان مستخلصات بذور الحرمل المائية والكحولية أدت الى تثبيط معنوي فـــي دليل الانقسام الخلويMitotic index لخلايا القمة النامية في جذور نبات البصل مقارنة بمعاملة السيطرة وقد زاد تثبيط دليل الانقسام كلما زادت تراكيز المستخلصات ولم يتاثر دليل الانقسام بزيادة مدة التعريض , ونظرا لكــــــون التراكيز %100و25% للمستخلص المائي و الكحولي على التوالي خفضت دليل الانقسام MI تقريبا 50% مقارنة بمعاملة السيطرة لذا عدت تراكيز شبه مميتة , اما التركيز 200% عند كلا المستخلصين المائي والكحولي فقد خفضت دليل الانقسام MI تقريبا الى 22% من معاملة السيطرة فعدت تراكيز مميتة.
بينت النتائج كذلك بان مستخلصات بذور الحرمل المائية والكحولية أدت الى انخفاض معنوي فــي دليل الطور التمهيدي وارتفاع معنوي في دليل الطور الاستوائي , فضلا عن ظهور نسبة عالية من التشوهات الكروموسومية في جذور نبات البصل المعرضة للمستخلصات المائية والكحولية لبذور الحرمل وقد ازدادت نسبة التشوهات مع زيادة تراكيز المستخلصات ومدة التعريض وكانـت اكثر التشوهات الكروموسومية تكرارا هــــــــــــــــــــــــــي (الكروموسومات اللزجةStickiness ,الجسور الكروموسومية Bridge ,التشتــــــــــــــــــت الكروموسومي Disturbed chromosome , الاستوائي الكولشسينى C-mitosis) وقــد ظهرت تشوهات كروموسومية اقل تكرارا (الكروموسومات المتأخرةLagging chromosome ,الانفصالي النجمي Star anaphase,القطب المنتقل Shifting of poles, التعدد الكروموسوميPolyploidy ) .
درس تأثير مستخلصات بذور الحرمل في دنا DNA جذور نـــــــبات البصل باستعمال تقانة التضاعف العشوائي المتعدد الاشكال RAPD.استخدم 10 بادئات عشوائية سبعة مـــــــــنها فقط اعطت حزما متعددة لجميع العينات المدروسة ,وبأوزان جزيئية تراوحت بـين (1400- 90) زوج قاعدة, بيــنت نتائج التضاعف العشوائي بان مستخلصات بذور الحرمل المائية والكحولية ولجميع التراكيز المستعملة سببت أضرارا في دنا DNA جذور نبات البصل وأحدثت طفرات عديدة ظهرت على شكل فقدان لحزمة او اكثر او اضافة لحزم جديدة, لوحظ كذلك بان مجموع الحزم المفقودة والمكتسبة في العينات المعاملة بالمستخلص الكحولي (43) حزمة اما في العينات المعاملة بالمستخلص المائي فكانت (35) حزمة لــذا فان المستخلص الكحولي كان اكثر تاثيرا في دنا جذور نبات البصل من المستخلص المائي واظهرت النتائج ان عدد مجموع الحزم المكتسبة كان اكثر من مجموع الحزم المفقودة في جذور نبات البصل ولكلا المستخلصين ومع اغلب البؤادئ المستعملة اذ كان مجموع عدد الحزم الجديدة في العينات المعرضة للمستخلص المائي 27)) حزمة وللمستخلص الكحولي 32)) حزمة بينما كان مـجموع عدد الحزم المفقودة في العينات المعاملة بالمستخلص المائي 8)) حزم وللمستخلص الكحولي 11)) حزمة.
انخفضت قيمة الاستقرار الجيني %(GTS) Genomic template stability ابتداءً من التركيز 10% لكلا المستخلصين وقد ازدادت قيمة GTSبالانخفاض كلما زاد تركيز المستخلص موضــــحا وجود أضرار اكبر للدنا مع زيادة تراكيز المستخلصات.انخفضت قيمة GTS فــــي العينات المعاملة بالمستخلص الكحولي بنسبة اكبر من انخفاضها في العينات المعاملة بالمستخلص المائي اذ كان أعلى انخفاض 78.56% عــــــند التركيز 200,25% في العينات المعاملة بالمستخلص المائي بينما كان أعلى انخفاض 69.03 % عـــــــند التركيز 50% في العينات المعاملة بالمستخلص الكحولي تؤكد هذه النتيجة ان المـــــــستخلص الكحولي أكثر سمية وراثية من المستخلص المائي في جذور نبات البصل .
بينت شجرة القرابة الوراثية للعينات المعرضة لمستخلصات بذور الحرمل فضلا عن معاملة الســـــيطرة باستعمال معامل Jaccard للتباين الوراثي واعتمادا على نتائج التضاعف العشوائي متـــــــــــــــعدد الاشكال (RAPD) انعزلت عينات البصل المعرضة للمستخلص المائي عــــن تلك المعرضة للمستخلص الكحولي , فضلا عن انعزال معاملة السيطرة في مجموعة منفردة مما يؤكد الأضرار العالية التي تحدثها مستخلصات بذور الحرمل في دنا DNAجذور نبات البصل.
وحضر المناقشة جمع من اساتذة الكلية وطلبة الدراسات العليا والضيوف الكرام .
تمنياتنا للطالب سيف محمد ابراهيم بدوام الموفقية والنجاح.
